Flynn Carson (interpretado por Noah Wyle), após anos a vaguear no estrangeiro, regressa à Biblioteca Metropolitana de Nova Iorque com planos de retomar o seu antigo emprego e estabelecer uma vida estável. No entanto, um sonho estranho desfaz esses planos, levando-o até Nova Orleães. Lá, ele envolve-se num enorme esquema do infame príncipe vampiro Vlad Dracul. Flynn tem de superar os seus medos, como outrora, para proteger um artefacto lendário – o Santo Graal da Última Ceia.Jonathan Frakes continua no papel de Judson, o antigo bibliotecário que agora ascendeu a diretor. Judson, ex-fuzileiro naval, é um especialista em combate. Jane Curtin repete o seu papel do filme anterior como Charlene – a rígida, séria, severa e emocionalmente distante chefe de recursos humanos.A atriz de "Heroes", Stana Katic, assume o papel feminino principal no terceiro filme. A sua mais recente personagem cinematográfica chama-se Simone Renoir, uma cantora de um clube de jazz em Nova Orleães cujas atuações hipnóticas rapidamente cativam o volúvel Flynn. Na verdade, a sua identidade secreta é a de guardiã do Santo Graal, disposta a tudo para impedir que outros descubram o seu paradeiro. Além disso, tem outra identidade – há 400 anos, o príncipe vampiro Vlad Dracula transformou-a num vampiro (ai, mais vampiros), e ela procura incansavelmente este demónio que lhe roubou a alma e a condenou a vaguear pela noite. Flynn está disposto a ajudá-la... assim começa uma jornada de amor e ódio...