Em 2012, a humanidade foi infetada por um vírus desconhecido, e Nova Iorque tornou-se uma cidade deserta. Robert Neville (interpretado por Will Smith) é um cientista ao serviço do exército e um dos sobreviventes imunes ao vírus. Durante o dia, ele percorre as ruas com o seu cão Sam à procura de comida, utiliza um rádio para tentar encontrar outros sobreviventes e trabalha no laboratório para descobrir uma cura para o vírus. À noite, refugia-se em casa, pois aqueles que foram infetados pelo vírus e não morreram transformaram-se em "criaturas noturnas" - seres que só saem durante a noite, perderam a razão e atacam qualquer pessoa.